【評價原理】
OECD近年大力推崇的“有害結局路徑”(Adverse Outcome Pathway,AOP)毒性評估策略來測試類雌激素這一大類有害物質。本方法參照糧農組織和世界衛生組織(FAO/WHO,2000)關于雌激素物質最高日攝取量來評估測試物的安全性,通過轉基因標記技術表達的綠色熒光蛋白含量來量化類雌激素物質含量,綠色熒光蛋白特異性地在肝臟表達,一旦供試品中含一定量的類雌激素化學物質,雌激素轉基因斑馬魚暴露后肝臟部位會出現綠色熒光,可用綠色熒光量化供試品中的類雌激素物質含量,從而達到檢測效果。
【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成兩組,分別是正常對照和供試品組(供試品通過溶解到養魚用水或注射的方式攝入到斑馬魚體內)。
攝入供試品一段時間后,我們在熒光顯微鏡下觀察斑馬魚肝臟熒光。
【結果展示】
圖1.含類雌激素物質的供試品處理后斑馬魚熒光表型圖
黃色曲線部位為肝臟,綠色熒光量化類雌激素含量
可以看到,攝入供試品組肝臟部位有明顯的綠色熒光。
【評價結論】
1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗,攝入含類雌激素物質的供試品組斑馬魚肝臟熒光明顯,與正常對照組存在明顯差別。
2.本實驗證實了該供試品含有類雌激素物質。
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